檢測器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為可供檢測的信號，常用檢測器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學(xué)發(fā)光等。
1.紫外可見吸收檢測器(ultraviolet－visibledetector，UVD)
紫外可見吸收檢測器(UVD)是HPLC中應(yīng)用zui廣泛的檢測器之一，幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器。其特點是靈敏度較高，線性范圍寬，噪聲低，適用于梯度洗脫，對強吸收物質(zhì)檢測限可達1ng，檢測后不破壞樣品，可用于制備，并能與任何檢測器串聯(lián)使用。紫外可見檢測器的工作原理與結(jié)構(gòu)同一般分光光度計相似，實際上就是裝有流動地的紫外可見光度計。
用途：紫外檢測器使用于大部分常見具有紫外吸收有機物質(zhì)和部分無機物質(zhì)。紫外檢測器對占物質(zhì)總數(shù)約80%的有紫外吸收的物質(zhì)均可檢測，既可測190--350 nm范圍的光吸收變化，也可向可見光范圍350---700 nm 延伸。
紫外檢測器適用于有機分子具紫外或可見光吸收基團，有較強的紫外或可見光吸收能力的物質(zhì)檢測。一般當(dāng)物質(zhì)在200-400 nm 有紫外吸收時，考慮用紫外檢測器。
優(yōu)點：紫外吸收檢測器不僅靈敏度高、噪音低、線性范圍寬、有較好的選擇性，而且對環(huán)境溫度、流動相組成變化和流速波動不太 敏感，因此既可用于等度洗脫，也可用于梯度洗脫。紫外檢測器對流速和溫度均不敏感，可于制備色譜。由于靈敏高，因此即使是那些光吸收小、消光系數(shù)低的物質(zhì) 也可用UV檢測器進行微量分析。
不足之處在于對紫外吸收差的化合物如不含不飽和鍵的烴類等靈敏度很低。
紫外可見吸收檢測器
(1)紫外吸收檢測器
紫外吸收檢測器常用氘燈作光源，氘燈則發(fā)射出紫外-可見區(qū)范圍的連續(xù)波長，并安裝一個光柵型單色器，其波長選擇范圍寬(190nm～800nm)。它有兩個流通池，一個作參比，一個作測量用，光源發(fā)出的紫外光照射到流通池上，若兩流通池都通過純的均勻溶劑，則它們在紫外波長下幾乎無吸收，光電管上接受到的輻射強度相等，無信號輸出。當(dāng)組分進入測量池時，吸收一定的紫外光，使兩光電管接受到的輻射強度不等，這時有信號輸出，輸出信號大小與組分濃度有關(guān)。
局限：流動相的選擇受到一定限制，即具有一定紫外吸收的溶劑不能做流動相，每種溶劑都有截止波長，當(dāng)小于該截止波長的紫外光通過溶劑時，溶劑的透光率降至10%以下，因此，紫外吸收檢測器的工作波長不能小于溶劑的截止波長。
(2)光電二極管陣列檢測器(photodiodearraydetector，PDAD)
也稱快速掃描紫外可見分光檢測器，是一種新型的光吸收式檢測器。它采用光電二極管陣列作為檢測元件，構(gòu)成多通道并行工作，同時檢測由光柵分光，再入射到陣列式接收器上的全部波長的光信號，然后對二極管陣列快速掃描采集數(shù)據(jù)，得到吸收值(A)是保留時間(tR)和波長(l)函數(shù)的三維色譜光譜圖。由此可及時觀察與每一組分的色譜圖相應(yīng)的光譜數(shù)據(jù)，從而迅速決定具有*選擇性和靈敏度的波長。
單光束二極管陣列檢測器，光源發(fā)出的光先通過檢測池，透射光由全息光柵色散成多色光，射到陣列元件上，使所有波長的光在接收器上同時被檢測。陣列式接收器上的光信號學(xué)的方法快速掃描提取出來，每幅圖象僅需要10ms，遠遠超過色譜流出峰的速度，因此可隨峰掃描。
2．熒光檢測器(fluorescencedetector，F(xiàn)D) 熒光檢測器是一種高靈敏度、有選擇性的檢測器，可檢測能產(chǎn)生熒光的化合物。某些不發(fā)熒光的物質(zhì)可通過化學(xué)衍生化生成熒光衍生物，再進行熒光檢測。其zui小檢測濃度可達0.1ng／ml，適用于痕量分析；一般情況下熒光檢測器的靈敏度比紫外檢測器約高2個數(shù)量級，但其線性范圍不如紫外檢測器寬。近年來，采用激光作為熒光檢測器的光源而產(chǎn)生的激光誘導(dǎo)熒光檢測器極大地增強了熒光檢測的信噪比，因而具有很高的靈敏度，在痕量和超痕量分析中得到廣泛應(yīng)用。
熒光檢測器
特點：選擇性高，只對熒光物質(zhì)有響應(yīng)；靈敏度也高，zui低檢出限可達10-12ug/ml，適合于多環(huán)芳烴及各種熒光物質(zhì)的痕量分析。也可用于檢測不發(fā)熒光但經(jīng)化學(xué)反應(yīng)后可發(fā)熒光的物質(zhì)。如在酚類分析中，多數(shù)酚類不發(fā)熒光，為此先經(jīng)處理使其變?yōu)闊晒馕镔|(zhì)，而后進行分析。
在線咨詢